Confocale microscoop
Voor de functionaliteit en de werking van een confocale microscoop moet met veel aspecten rekening worden gehouden.
Wat is een confocale microscoop?
Vóór het lichtontvangende element van confocale microscopen zit een gaatje (speldenprikgrote opening) om omgevingslicht en onscherp licht in beeldvorming te blokkeren. Zo kan door de microscoop de positie die het meest intense licht heeft gereflecteerd, als de werkelijke hoogte gebruiken. In het volgende gedeelte worden de afzonderlijke stappen van het detectieproces van de confocale 3D-laserscanmicroscoop van KEYENCE beschreven.
Hoe werkt een confocale microscoop?
In het volgende gedeelte wordt in vier stappen het confocale principe beschreven.
1. Lichtoverdracht
- A
- Lichtbron
- B
- Objectief
- C
- Doel
Confocale microscopen stralen licht via het objectief uit op het doel. Het licht wordt via een objectief in het brandpunt van het gewenste meetgebied van het doel gericht.
2. Gereflecteerd licht
- A
- Gaatje
- B
- Halfdoorlatende spiegel
- C
- Lichtontvangend element
Het doel op het brandpunt weerkaatst het licht door het optische systeem naar een halfdoorlatende spiegel die het licht naar het lichtontvangende element leidt.
3. Gereflecteerd licht gaat door het gaatje.
- A
- Geconcentreerd laserlicht
- B
- Halfdoorlatende spiegel
Een gaatje vóór het lichtontvangende element blokkeert al het focuslicht dat wordt weerkaatst door het monster.
4. Scherpstellen
- A
- Wanneer scherpgesteld
- B
- Wanneer niet scherpgesteld
Alleen licht dat door het gaatje gaat, wordt scherpgesteld. Het overige licht van de confocale microscoop wordt geabsorbeerd door het gemarkeerde gebied. Als het doel zich niet in het brandpunt bevindt, wordt het licht gericht op een punt dat zich buiten dat gaatje bevindt, waardoor de lichtbundel van de confocale microscoop breder wordt en het licht niet langer in het gaatje zelf valt. Hiervoor valt er minder licht op het lichtontvangende element. Door de confocale microscoop wordt op basis van de intensiteit van het licht dat wordt gereflecteerd door het lichtontvangende element, vastgesteld of het doel zich in het brandpunt bevindt. Bijgevolg valt het licht alleen op het lichtontvangende element vanaf het gebied van het doel dat is scherpgesteld, en wordt het licht van alle andere gebieden geblokkeerd.
In de 3D-laserscanmicroscoop van KEYENCE wordt in combinatie met een laserpuntscanner het confocale principe gebruikt om met één klik snelle, nauwkeurige en geautomatiseerde metingen uit te voeren.
